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親和層析介質(zhì)的工作原理是怎樣的？

親和層析是一種根據(jù)生物分子之間的特異相互作用來(lái)分離蛋白的層析方法，如酶和底物、受體和配體、抗體和抗原。這種作用是特異性的也是可逆的，通過(guò)這種可逆的結(jié)合和分離來(lái)達(dá)到蛋白純化的目的。生物分子與親和層析介質(zhì)上的配體通過(guò)共價(jià)鍵、范德華力、疏水力、靜電力等作用發(fā)生生物學(xué)專(zhuān)一性結(jié)合形成復(fù)合物，共價(jià)鏈接在載體表面的功能團(tuán)配體上。蛋白質(zhì)親和層析技術(shù)通過(guò)目標(biāo)蛋白質(zhì)與配體間通過(guò)特異性親和力吸附而達(dá)到分離純化的目的，具有生物專(zhuān)一性的特點(diǎn)，純化效率高。親和層析是應(yīng)用生物高分子與配基可逆結(jié)合的原理，將...

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依科賽胎牛血清FSP500試用后常見(jiàn)的問(wèn)題

客戶(hù)在收到依科賽胎牛血清FSP500后的需立即確認(rèn)胎牛血清有無(wú)異常，如血清有沒(méi)有出現(xiàn)融化情況、瓶口及瓶身有無(wú)出現(xiàn)碎裂、瓶口是否密封完整等情況。血清融化方法：建議產(chǎn)品使用梯度溶解法，將血清從-20℃冰箱取出后，于2-8℃解凍過(guò)夜，并在此過(guò)程中不時(shí)輕輕搖動(dòng)使之溶解均勻。那么，細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)的黑點(diǎn)是污染嗎？更換依科賽胎牛血清FSP500后發(fā)現(xiàn)細(xì)胞鏡下觀察有黑點(diǎn)，需要肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)液有無(wú)混濁的情況出現(xiàn)，其次鏡下觀察細(xì)胞中的黑點(diǎn)是否有游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就...

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AusgeneX澳洲胎牛血清使用前需要離心嗎？

血清的質(zhì)量對(duì)實(shí)驗(yàn)成敗起著關(guān)鍵性作用，但血清使用不當(dāng)也可能會(huì)導(dǎo)致血清質(zhì)量下降，造成細(xì)胞培養(yǎng)效果不理想。AusgeneX澳洲胎牛血清很珍貴，大家在血清使用時(shí)怎樣確定血清使用濃度？這個(gè)只能通過(guò)測(cè)試了。原則上血清添加量不要太多，通常分為5%、10%、20%幾檔。部分細(xì)胞原代提取時(shí)會(huì)使用20%血清，大部分細(xì)胞正常培養(yǎng)時(shí)會(huì)使用5%～10%的血清濃度。至于某一株細(xì)胞適應(yīng)什么樣的血清濃度，還需要根據(jù)細(xì)胞特性、實(shí)驗(yàn)?zāi)康淖鰷y(cè)試和調(diào)整。血清使用前需要離心嗎？這個(gè)問(wèn)題有以下兩種可能：其一，因?yàn)檠迦?..

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您真的會(huì)使用eBlot L1快速濕轉(zhuǎn)儀嗎？

eBlotL1快速濕轉(zhuǎn)儀是用來(lái)轉(zhuǎn)印蛋白的儀器，電泳轉(zhuǎn)印為轉(zhuǎn)移蛋白常用的方法，該技術(shù)有效、迅速，并且使得蛋白在凝膠中保持高分辨率。在凝膠中向印跡膜載體轉(zhuǎn)印分離的蛋白質(zhì)的過(guò)程，即是電泳轉(zhuǎn)印法。因?yàn)榇思夹g(shù)往膜上轉(zhuǎn)印蛋白GX、快速和準(zhǔn)確，并且能夠使得蛋白在凝膠中保持高分辨率，在轉(zhuǎn)移印跡技術(shù)中得到廣泛的應(yīng)用。eBlotL1快速濕轉(zhuǎn)儀準(zhǔn)備工作：1、準(zhǔn)備對(duì)緩沖液進(jìn)行轉(zhuǎn)移，緩沖液的pH值.不要無(wú)故調(diào)整，如果儀器過(guò)熱出錯(cuò)，那么可能選擇了不適合的緩沖液。2、通電以后，凝膠在轉(zhuǎn)移緩沖液中平衡，平衡...

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澳洲胎牛血清的正確存放與解凍的方法總結(jié)

澳洲胎牛血清的正確存放與解凍是各位實(shí)驗(yàn)家尤為關(guān)注的一個(gè)問(wèn)題，在保證質(zhì)量的前提下，胎牛血清的正確存放與解凍的方法總結(jié)如下：1、澳洲胎牛血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃的冰箱使之全融。但必須注意的是，溶解過(guò)程中必須規(guī)則的搖晃均勻；2、長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。因此，推薦在-20℃以下存儲(chǔ)血清，避免反復(fù)凍融。3、建議血清硬保存在-20℃條件下。若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)1個(gè)月。若一次無(wú)法用完一瓶，建議無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜?..

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關(guān)于澳洲胎牛血清，有什么是我們不知道的

胎牛血清作為細(xì)胞生長(zhǎng)*的重要營(yíng)養(yǎng)來(lái)源一直備受科研人員重視，那么澳洲胎牛血清在參與細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)都發(fā)揮著什么作用呢？胎牛血清，是胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量很大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必需...

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總結(jié)His抗體蛋白純化的常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法

His抗體能夠特異性識(shí)別His標(biāo)簽，可以用于定性定量檢測(cè)His融合蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)定位等。為了讓大家詳細(xì)的了解該抗體，下面小編就介紹一下標(biāo)簽抗體進(jìn)行蛋白純化常見(jiàn)的問(wèn)題及解決方法。His抗體蛋白純化常見(jiàn)問(wèn)題：一、蛋白不和介質(zhì)結(jié)合可能原因：超聲功率不合適（太大，蛋白碳化，太小，蛋白沒(méi)*釋放）解決方法：改變超聲功率或者其它方法破碎細(xì)胞。樣品或緩沖液不合適解決方法：確保緩沖液中螯合劑，還原劑，咪唑濃度不是很高。His標(biāo)簽暴露不*解決方法：在緩沖液中加變性劑（4-8M尿素，4-6M鹽...

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胎牛血清供應(yīng)量改變帶來(lái)的價(jià)格波動(dòng)

隨著創(chuàng)新藥物研發(fā)的崛起，哺乳動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)成為生物制藥中*的一部分。目前，利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)的生物制品越來(lái)越多，進(jìn)一步拓寬了細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用范圍，而胎牛血清作為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中的關(guān)鍵組分之一，在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中占據(jù)重要地位。由于血清采集時(shí)間早，其胎球蛋白較多，并富含多種生長(zhǎng)因子。同時(shí)，由于未接觸外界環(huán)境，血清所含的內(nèi)毒素、補(bǔ)體等細(xì)胞有害成分和抗體水平均是較低的。因此，血清從細(xì)胞培養(yǎng)的效果來(lái)看是不錯(cuò)的牛血清制品，在細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用較為廣泛。由于海關(guān)總署對(duì)供應(yīng)企業(yè)...

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